肉的宰后嫩化决定性归因于肌原氯纶的构造的破环，肌原氯纶的构造是由内源性球蛋清质酶电离酶溶解塑料肌原氯纶和神经元骨架球蛋清质酶引发的。与数十几年来一种是关注度焦聚的钙球蛋清质酶酶差异，胱天球蛋清质酶酶（caspases）近些年作为感爱好情况下题。胱天球蛋清质酶酶在神经元凋亡的执行命令的时候起着至关决定性的做用，这之中caspase-3在死去球蛋清质酶电离中的做用是相互面和复杂化的，因就能够进一个步骤浅论。S-亚硝基化确认调试钙放出、能量转换分解、球蛋清质酶质溶解塑料和神经元凋亡来调试口感，包含嫩度和持水技能。刚开始浅论发展S-亚硝基化就能够变动依耐线粒体的caspase-3级联发生反应，这可能会是肌肤神经元凋亡和牛肉片品控变迁的情况。caspase-3的浅论重点是是其与神经元凋亡的关联，其实，好少有浅论浅论S-亚硝基化调试caspase-3的管理机制。

2024年9月由常州水产业大学本科张万刚专家团对在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱微生物为该研究提供了亚硝基化体现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

2英文网站标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

期刊杂志：Journal of Agricultural and Food Chemistry

202四年引响指数：5.7

发表论文時间：2024年9月

老客户院校：南京农业大学

深入分析素材：蛋白

拜谱具备技艺：亚硝基化修饰组学

技能规划：

一、分析导致

01.Caspase-3活力性

到目前为止尚不清除NO对caspase-3的减弱效应是不是也归因于NO介导的S-亚硝基化，的不同酸度均值的GSNO是外源性NO供货，以诱导型caspase-3的身体外S-亚硝基化。结杲表达，与如果没有GSNO的组比起来，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活力取得大幅度有效降低（图1），与仍然曝光共同。GSNO正确处理大幅度有效降低caspase-3活力的因素病因仍亟需具体分析。

图1 有差异浓硫酸浓度的GSNO除理对caspase-3活性酶的后果

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化度

科学探析方案Caspase-3的亚硝基化情况，以阐释GSNO对Caspase-3的有反应性。经GSNO治理 后，测量到caspase-3血清S-亚硝基化承载力加大（图2）。等等数据表述，外源性GSNO培养出来可实现目标诱骗caspase-3的离体S-亚硝基化。最令难以相信的是，在没了GSNO存在着的较组中测量到一家变弱的S-亚硝基化带，这表述caspase-3或许有内源性的S-亚硝基化。不仅，本科学探析方案中caspase-3的S-亚硝基化情况较高，而caspase-3的活力下降，这与的时候的科学探析方案一致性。同时，caspase-3的特喜欢的人S-亚硝基化掩盖位点尚不模糊不清，还所需进第一步的探求。

图2 GSNO加工处理对caspase-3S-亚硝基化横向的决定

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码字段。紫色标识图片的编码字段提出S-亚硝基化肽，紫色标识图片的C提出S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3吸附结蛋白质

结球核血清酶成为一些最为重要的細胞骨架球核血清酶，在维护肌細胞框架的框架详细性和收宿性地方起着最为重要反应，的研究S-亚硝基化caspase-3对结球核血清酶吸附塑料的刺激性性极具最为重要真正意义。与Std（未用胱天球核血清酶酶-3和GSNO孵育的起始肌人造弹性纤维球核血清酶）组比较，0 μM GSNO组（肌原人造弹性纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的详细结球核血清酶含水量同质性大幅度降低，建议caspase-3对结球核血清酶极具存在的球核血清酶淀粉水解特性。在GSNO孵育后，详细结球核血清酶的含水量很深提升（P < 0.05）。不但，当GSNO浓度值增大时，详细结球核血清酶的含水量连续调涨（P < 0.05）（图5）。某种找到显示，SNO修饰语的caspase-3以横向依赖感的行为能够抑制结球核血清酶的吸附塑料。

图5.S-亚硝基化caspase-3化学降解结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3生物降解肌钙蛋白酶-T

肌钙核球球淀粉酶酶-T (TnT)是原肌球核球球淀粉酶酶调准否则背部肌肉回缩的细条的必要肌原仟维板材料核球球淀粉酶酶。TnT的化学分解结构特征是检验到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化必要条件下，caspase-3对TnT的化学分解问题如下图6一样，与Std组（包涵caspase-3和GSNO的肌原仟维板材料）相对，caspase-3组中30 kDa TnT场面描写特殊加强，表述caspase-3参与性了TnT的化学分解，前者，caspase-3与GSNO的孵育应响30 kDa TnT限制。在100和200 μM GSNO组相互之间没检验到很深的不同(P > 0.05)，而当GSNO的溶度满足400 μM 时，该场面描写特殊限制(P < 0.05)。这一些得知表述了SNO掩盖的caspase-3对TnT化学分解的调控效果。结核球球淀粉酶酶和TnT是caspase-3的敏锐底物，而GSNO净化处理调低caspase-3的生物可能应响肌原仟维板材料核球球淀粉酶酶化学分解的程度调低。总而言之根据上述，NO诱导型的S-亚硝基化能够 用掩盖半胱氨酸残基来调准caspase-3的生物，因而进一歩应响其对结核球球淀粉酶酶和TnT的核球球淀粉酶酶溶解实力，为了应响羊肉高质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3生物降解肌钙血清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结ppt

本探析致力于讨论S-亚硝基化对caspase-3表达的引响试述随后不久对羊肉肌原棉合成纤维休外溶解的引响。蛋清S-亚硝基化可能表达caspase-3的半胱氨酸残基，使得使得caspase-3活性酶拉低，进第一步抑制性了其对羊肉肌原棉合成纤维蛋清的蛋清溶解专业能力。

三、拜谱工作小结

探索进行了酶活核查，亚硝基化掩盖组学讲解，WB等测量法律手段，看见核蛋清质质S-亚硝基化应该掩盖caspase-3的半胱氨酸残基，这引起了caspase-3几丁质酶的影响，齐头并进一点治理和改善了其对鸡肉肌原氯纶核蛋清质质的核蛋清质质淀粉水解程度。本探索为释义核蛋清质质质亚硝基化对色泽的政策调控逻辑打造了个新的第三视角。

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关联性学术论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663